当涉及液体介质的蒸汽灭菌时，存在许多以各种方式处理的用户顾虑。使用生物指示器（BI）监测这些循环以及所做的各种限制和循环修改可能导致假阳性或失败循环。以下是用户对液体介质蒸汽灭菌的一些循环修改或限制：
使用者需要在消毒过程中将培养瓶保持在容器中，因此沸腾不会遍布高压
灭菌器。
根据制造商的说明，用户需要在121°C下对介质进行15分钟的灭菌。用户无法找到在此短周期内死亡的BI。
由于介质对热敏感，因此用户无法运行更长的循环时间，如果使用更长的循环时间，则可能无法促进增长。
用户的协议规定仅在15分钟，121°C的循环中运行。
用户已确定1L TSB瓶的循环暴露时间。现在，2升烧瓶应该用什么时间; 我加倍的时间？
当使用液体负载时会出现许多独特的问题，如果循环用于硬质货物或包装货物，则永远不会出现。大多数项目不会对温度敏感，因此不必担心BI放置的沸腾或质疑。然而，对于液体负载，不需要将真**空气去除或蒸汽渗透到多孔负载中。
验证负载配置：
那么，为什么液体培养基灭菌和BI杀伤力会出现这么多问题呢？用于解决上述问题的一些方法实际上可能导致失败的周期或BI为正的周期。这很大程度上是由于许多诊所，大学或医院中使用的大多数液体负载/介质循环配置未经验证的事实。验证负载配置周期提供了“获取，记录和解释确定过程将始终如一地产生符合预定规格的产品所需结果的文档化程序”（ISO / TS 11139：2006，定义2,55 2）在消毒介质中，期望的结果是产生具有某些品质的培养基，例如pH范围，生长促进能力和不育性。
执行液体灭菌验证：
当对要使用的所选曝光时间/温度液体介质循环进行验证时，需要确定从循环开始到使介质达到121℃所需的时间。这将被记录为该特定周期所需的“上升”时间。如果使用1L培养基培养基完成，则需要对包括更大体积（例如2L培养瓶）的循环进行单独验证。为了确定装载两个1L TSB烧瓶的“启动”时间，可以将温度记录仪放入每个培养基瓶中以记录整个循环持续时间内的培养基温度。该活性将重复至少两个循环，每个循环含有新制备的培养基烧瓶。所有三个周期的“出现”时间应非常相似。例如，如果
现在有数据支持，在特定介质的一定数量的1L烧瓶的情况下，介质的温度将在循环开始的16分钟内达到121℃。应记录烧瓶的数量和每个烧瓶的体积以及它们在高压灭菌室内的位置，并且除非使用其他放置区域或更少的烧瓶进行继续验证，否则在将来使用的其他循环中必须保持相同。有必要验证zui坏情况的负载，以便能够预先确定所有其他负载在指定的16分钟“上升”时间内也将达到121°C的温度。
使用数据记录器：
一个非常容易使用的热敏电阻或数据记录器，用于在灭菌周期内记录介质的温度，可以很容易地放在实际的介质瓶内。通过这样做，可以确定正在消毒的实际温度。将数据记录器放置在高压釜室内的架子上将不会显示在培养瓶内实际发生的情况。记录仪实际上必须放在介质瓶内。
在较长周期内运行媒体可能不会对媒体和增长促进能力产生不利影响。毕竟，运行35分钟的周期需要20分钟的启动时间实际上是在121°C下的15分钟周期。如果担心周期长度，请运行周期，然后测试介质并验证它是否仍按预期执行，并且增长促销没有受到影响。
每个瓶中运行不同的容量或在一个循环中运行不同数量的烧瓶是需要进行额外验证工作的情况。运行1L烧瓶可能需要35分钟的循环，其中几个2L烧瓶可能需要额外的时间用于上升，并且可能需要45分钟或更长时间。通过使用数据记录器，可以轻松确定将不同体积的介质达到121°C所需的各种曝光时间。
