实验室立式高压蒸汽灭菌锅主要由锅体、加热丝、排气阀、安全阀、压力表、微控电脑构成。
1．shou先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内参加适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。
2．放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。留意不要装得太挤，避免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果。三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁触摸，避免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。
3．加盖，并将盖上的排气软管刺进内层灭菌桶的排气槽内。再以两两对称的方法一起旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧共同，勿使漏气。 4．设定温度，用电或煤气加热，并一起翻开排气阀（注：安全阀一直是关闭的），使水欢腾以扫除锅内的冷空气。待冷空气彻底排尽后，压力表呈现细微上升，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力添加而逐步上升。当锅内压力升到所需压力时，开端计时，操控热源，保持压力**所需时刻。
5．灭菌所需时刻到后，堵截电源或关闭煤气，让灭菌锅内温度和压
力天然下降，当压力表的压力降**0时，翻开排气阀，旋松螺栓，
翻开盖子，取出灭菌物品。如果压力未降到0时，翻开排气阀，就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于表里压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，形成棉塞感染培养基而发作污染。6．将取出的灭菌培养基放入 37℃温箱培养24小时，经查看若无杂菌成长，即可待用。
1 、在运用前先查看下面排气瓶里的水位，要使其介于**高线和**低 线的中间方位偏下，不然要将水倒出，再持续操作。（注：此水壶是蒸汽冷凝后接冷凝水的，与锅内的水位无关）
2 、操作进程中翻开要留意确保压强为0，温度低于97℃，避免形成不必要的损伤）。
3 、拿出上面的篮子，向里边加RO水/单蒸水，使水位线**少超越**下面篮子底部（如果里边有水，需查看水位，并确保水没有被污染，不然要将水排掉，从头换过）。
4、 然后即将灭菌的东西放入篮子里，再渐渐的把篮子放入锅内，盖上盖子，顺时针旋紧排气阀。
5 、插上电源，翻开开关，操控盘灯会亮起，预备操作。 6、 按MODEL键挑选你所需求的操作模型。（如有需求，挑选你所需求的时刻和温度）。
7 、按START键，开端灭菌。(升温进程缓慢，不同的形式也不同，大约在30min左右)。
8 、当设置的时刻到的时分，仪器会连响三下，当温度降到97℃的时分，仪器要连响六下，当温度下降到60℃的时分 ，仪器要响十下，整个灭菌进程完结。（大概要一个小时左右）。
9 、让灭菌锅的压强降到0，温度要降到80℃以下，然后按STOP 键， 停止操作，此刻已将主动转到制冷系统，然后关掉开关，切掉电 源。
10、 翻开盖子，将灭好菌的东西拿出来，再将盖子盖好。 11 、排水，待水充沛冷却后，翻开坐落前面的排水管，排水后关闭排水管。 留意事项：
1、彻底扫除锅内空气，使锅内全部是水蒸气，灭菌才干彻底。 2、 每次翻开灭菌锅前要确保温度在80℃以下和压强为0。 3、 灭菌用水必须用RO水/单蒸水，避免灭菌锅内积水垢。 4 、灭菌液体时，应将液体灌装在耐热玻璃瓶中，以不超越3/4体积
为好，瓶口选用棉花纱塞。
5. 压力表指针在0.05MPa以上时，不能过快放汽，以避免压力急速下
降，液体滚沸，从培养容器中溢出。
6. 如果灭菌后的培养基在锅内不及时拿出，需在蒸汽放尽后将锅盖打
开，切忌将培养基关闭在锅内过夜。
7. 如隔1个月左右不必，需将锅内水排掉，清洗灭菌锅。 8.瓶装液体禁止密封灭菌，应当在瓶塞上进行泄压处理。 9. 受热易挥发易爆物品禁止选用高压蒸气灭菌。
10.定时查看安全阀的功用，避免安全阀失效导致过高压力而爆破。
在同一温度下，湿热的灭菌效能比干热大，其原因有三：一是湿热中细菌菌体吸收水分，蛋白质较易凝结，因蛋白质含水量添加，所需凝结温度下降，二是湿热的穿透力比干热大；三是湿热的蒸汽有潜热存在，每1克水在100℃时，由气态变为液态时可放出2．26kJ（千焦）的热量。这种潜热，能迅速进步被灭菌物体的温度，然后添加灭菌效能。
在运用高压蒸汽灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气的扫除是否彻底极为重要，由于空气的胀大压大于水蒸汽的胀大压，所以，当水蒸汽中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。
