高压蒸汽灭菌锅的使用方法介绍

1、器件  
  牛肉膏蛋白胨培育基,培育皿(6套一包),手提式高压蒸汽菌锅等。  
2、操作过程  
  1.首先将内层灭菌桶取出,再向外层锅内参加适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。  
  2.放回灭菌桶,并装入待灭菌物品。注意不要装得太挤,避免防碍蒸汽流转而影响灭菌作用。三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触,避免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。  
  3.加盖,并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。再以两两对称的办法一起旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,勿使漏气。  
  4.用电炉或煤气加热,并一起翻开排气阀,使水欢腾以扫除锅内的冷空气。待冷空气彻底排尽后,关上排气阀,让锅内的温度随蒸汽压力添加而逐步上升。当锅内压力升到所需压力时,操控热源,保持压力**所需时刻。本试验用 1.05kg/cm2,121.3℃,20分钟灭菌。  
  5.灭菌所需时刻到后,堵截电源或关闭煤气,让灭菌锅内温度天然下降,当压力表的压力降**0时,翻开排气阀,旋松螺栓,翻开盖子,取出灭菌物品。如果压力未降到0时,翻开排气阀,就会因锅内压力俄然下降,使容器内的培育基由于表里压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口,构成棉塞感染培育基而发作污染。  
  6.将取出的灭菌培育基放入 37℃温箱培育24小时,经查看若无杂菌成长,即可待用。  
稀释倒平板法  
  先将待分离的资料用无菌水作一系列的稀释(如 1 ∶ 10 、 1 ∶ 100 、 1 ∶ 1000 、 1 ∶ 10000 …),然后分别取不同稀释液少量,与已溶化并冷却** 45 ℃左右的琼脂培育基混合,摇匀后,倾入灭过菌的培育皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保温培育必定时刻即可出出菌落。如果稀释妥当,在平板外表或琼脂培育基中就可呈现涣散的单个菌落,这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁衍构成的。随后挑取该单个菌落,或重复以上操作数次,便可得到纯培育。倒平板的两种办法 持皿法 
  ⑴将若干无菌培育皿叠放在左侧,便于拿取。  
  ⑵点着煤气灯,将火焰调到适中(空气不要太大,避免气流过急)。  
  ⑶倒平板时,先用左手抓住三角瓶的底部,倾斜三角瓶,用右手旋松棉塞,然后用右手的小指和手掌边际夹住棉塞并将它拔出(切勿将棉塞放在桌面上),随之将瓶口周缘在火焰上过一下(不行灼烧,以防爆裂,以杀死可指沾在瓶口外的杂菌。然后将三角瓶从左手传**右手中(用右手的拇指、食指和中指拿住三角瓶的底部),在这操作过程中瓶口应保持在离火焰2~3处,瓶口始终向着火焰。左手拿起一套培育皿,用中指、无名指和小指托住培育皿底部,用食指和大拇指夹住皿盖并敞开一缝,刚好能让三角瓶伸入,随后倒出培育基。一般约倒入12ml的培育基即可铺满整个皿底。盖上皿盖,置水平方位等凝。然后再将三角瓶移**左手,瓶口再次过火并塞紧棉塞。    平板培育基的冷凝办法有两种,一种是将平板一个个摊开在桌面上冷凝,另一办法是将几个平板叠在一起冷凝。前者冷凝速度较快,在室温较高时选用;而后者冷凝速度较慢,可在室温较低时选用,其长处是构成冷凝水少,特别适用于平板划线等的需求。  
叠皿法 
  此法过程与持皿法根本相同。不同点是左手不用持培育皿,而是将培育皿叠放在煤气灯的左侧并接近火焰,用右手拿住三角瓶的底部,左手的掌背对着瓶口,用小指与无名指夹住瓶塞,将其拔出,随即使瓶口过火,一起用左手敞开**上面的皿盖,倒入培育基,盖上皿盖即移**水平方位待凝。再顺次倒下面的平板。在操作过程中,瓶口应向着火焰保持倾斜状,以防空气中微生物的污染
 

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