1 脉动真空灭菌器作业原理与特色
1.1 脉动真空灭菌器作业原理
脉动真空式灭菌体系介于灭菌重力转换式器和高真空式灭菌器之间。
典型的蒸汽脉冲程序：在接连进蒸汽条件下，抽真空到10.7～13.3 kPa(80～100 mmHg)的肯定压力，重复2～3 次；或抽真空到10.7～13.3 kPa(80～100 mmHg)的肯定压力后，进一次蒸汽(一个蒸汽脉冲)，重复2～3次，从而使腔体内反复通入无热原蒸汽，到达腔内及灭菌物品冷空气的有用置换，使腔内无冷点。当腔内压力稳定时，灭菌蒸汽均匀地散布在腔内灭菌物品的有用部位进行彻底灭菌，确保了灭菌作用。接连进蒸汽有利于避免和降低物品中空气的残留量。脉动真空灭菌器腔室中的温度-压力曲线如图2所示。当然，假如因被灭菌物品性质对比特别而有必要时，可选用3 次以上的蒸汽脉冲和抽真空过程。制药企业常用的灭菌器一般属脉动式灭菌器，灭菌程序完成后，还需检漏，因而需进行相应的功用设置。
1.2 脉动真空灭菌器特色
shou要长处：(1)灭菌周期短；(2)不需求高的真空度；(3)空气滞留疑问小；(4)小装量条件下仍有好的灭菌作用。
shou要缺点：(1)被灭菌品装载过密时，灭菌作用差；(2)在真空度规模内，实现蒸汽脉冲需求较杂乱的辅助设备(如真空泵、冷凝器、喷射泵等)，从而给修理和养护增加了难度。
2 设备运用中常见疑问及解决办法
2.1 PLC毛病和触摸屏的黑、白屏景象
目前，在配有触摸屏式的脉动真空灭菌器傍边≥3.5 m3的设备中易发作PLC毛病和触摸屏的黑、白屏景象。
发作此景象的要素：(1)PLC、触摸屏自身的要素，如元件老化、DC24 V电源毛病等；(2)在灭菌完成后开门时，灭菌器内的蒸汽刹那间串出，与房间内空气触摸构成水蒸汽，对灭菌器的电路有些尤其是触摸屏、PLC影响较大，容易发作受潮短路。
解决办法：如元器件自身要素，可替换元器件，或选用加大灭菌器柜门上方的排潮电机功率、异地操控等办法。
2.2 真空泵继续作业负压不降低
发作此景象的要素：(1)真空泵自身的要素如真空泵动能降低、真空泵回转；(2)总水压过低 (＜0.1 MPa/cm2)；(3)水流速太小或自来水管道管径太细等。
解决办法：(1)对于客观要素给予替换部件，如真空泵、水压表、自来水管；(2)灭菌器自来水管**佳独自一管道,并在水压力表旁装置水流量表,以随时观察水压及水流速,避免因水流太小负压不降低,使真空泵产生干抽景象导致部件损坏。
2.3 灭菌器密封门打不开
发作此景象的要素：(1)闺阁有正压或负压；(2)门密封胶条没抽回；(3)程序在运转；(4)门电机发动电容损坏；(5)门内传动体系损坏等。
解决办法：(1)待室内压力回0后，再开门；(2)查看真空泵是不是抽暇，门密封管路是不是堵塞，泵是不是回转，是不是有水；(3)退出灭菌程序；(4)替换门电机发动电容，查看门电机；(5)查看门内传动体系。
3 影响灭菌作用的要素
3.1 物理/化学条件
在细菌构成芽孢过程中的多种环境要素会影响孢子的耐热性。例如，温度较高并有二价阳离子(如Ca2+ 、Fe2+ 、Mg2+ 、Mn2+)存在时，芽孢的耐热性增强。与此相反，当pH 超出6.0～8.0 的规模时，或在高浓度的盐水或磷酸盐中构成芽孢时，其耐热性降低。
自然界中芽孢的耐热性与环境条件有关，如溶液浓度、水分、pH、对芽孢有损害作用的物理要素以及对芽孢有抑制作用的化学品等，均会影响芽孢的耐热性。
包藏在晶体或有机物内的芽孢，其耐热性一般显着高于一般非包藏态的芽孢。因而，在某一温度条件下，将泥土包藏性芽孢和从泥土分离并培育得到的芽孢一起灭菌时，要想取得一样的灭菌作用，同一灭菌温度下，前者所需的灭菌时刻比后者要高出10多倍。因为被灭菌品受到了泥土中芽孢的污染，如在运送处理中被未经过滤空气微粒污染，或许因人员或别的物品触摸遭受污染时，要将芽孢彻底杀灭会很困难。正因为如此，GMP请求采纳全部必要的办法避免污染。
3.2 相对湿度
在热力灭菌中，水对杀灭细菌芽孢起着shou要作用。与水有关的灭菌方法只要2种：湿热和干热。湿度到达饱满[相对湿度(RH)为 100％(或 aw＝1.0)]时的灭菌方法称为湿热灭菌；相对湿度低于100％条件下的灭菌方法统称干热灭菌。实验数据标明，温度在90～125 ℃之间，相对湿度在20％～50％时，细菌芽孢较难杀灭；当相对湿度高于50％或低于20％时，则较易杀灭。这对挑选灭菌条件具有指导意义。
3.3 曝热时刻
灭菌过程中，原核细胞的逝世(被杀灭)遵从一级反响的规则。温度与某一时刻芽孢存活对数间的关系，在很多情况下呈线性。这就是说，在特定的灭菌温度下，任一时刻孢子逝世仅与这个时刻孢子的浓度有关，而使孢子数降低一个对数单位所需时刻并不受孢子初始浓度的影响。
4 脉动真空灭菌器的验证
脉动真空灭菌器的验证内容shou要有装置承认、运转承认及功能承认。
4.1 装置承认
(1)查看及挂号设备的厂商称号，设备称号、类型、生产厂商编号及生产日期，公司内部设备挂号号；(2)装置地址及装置情况是不是契合G家有关压力容器的请求；(3)设备规范规范是不是契合规划请求；(4)计量、外表的精确性和精确性；(5)设备相应的共用工程和建筑设备的配套，如电源、真空体系、压缩空气体系、冷却水等衔接是不是契合供货单位提出的请求；(6)各种附件和备品（如压力表、安全阀、电磁阀等）的规范、类型是不是核对和挂号；(7)拟定清洗规程及记载格局；(8)制定校对、保护养护及运转的SOP草案及记载表格局草案。#p#分页标题#e#
4.2 运转承认
(1)蒸汽压力和温度在设定的规模内；(2)灭菌器门的联锁体系安全可靠；(3)灭菌器正常运转所需的各种操作规程是不是树立；(4)温度监控设备的挑选和校验契合灭菌程序请求。
合格规范：灭菌器的各步程序运转正常，与操作阐明书相符，无显着误差；全部运转中，无反常噪声呈现。
4.3 功能承认
4.3.1 热散布实验
热散布实验是验证灭菌器不一样方位的温度均一性的一项shou要实验，以搞清灭菌过程中腔室内各个不一样方位的温差情况，为下一步热穿透实验提供依据。它包含空载热散布实验、满载(80%装载量)热散布实验。
4.3.1.1 热散布实验过程
(1)选用10～20个热电偶或热电阻作温度探头,编号，将其固定在灭菌器腔室的不一样方位并用特氟龙密封带和硅胶密封在灭菌器内温度探头的装置方位，应包含也许的高温点(如蒸汽入口处)及低温点(如冷凝水排放口)，别的有一只探头置于灭菌器温度操控探头处，一只探头置于灭菌器温度记载操控探头邻近，其余则均匀散布于灭菌器腔室内，以使温度的监测具有代表性。在满载热散布实验中，装载应尽也许运用待灭菌商品或类似物并留意不要将温度探头接入待灭菌的容器中，而应在其周围；(2)按初步设定的灭菌程序、灭菌参数及装载方法进行灭菌；(3)每种装载方法**少应进行3次重复性实验，对实验取得的数据进行收拾剖析，并在此基础上断定装载的冷点方位；(4)实验前后都要将温度探头放入冰点槽和油浴里校对；(5)一般可在几回空载实验断定出冷点方位后，进行**大和**小的装载实验；(6)对实验数据作统计剖析，**冷点和腔室均匀温度间差值不得超越±2.5 ℃，否则阐明设备功能差或存在某种毛病，形成此不良情况的要素在于规划、装置、装载方法或操控手段存在缺点，应加以改进。
4.3.1.2 热散布实验可接受的规范
(1)空载热散布灭菌室的温度均匀性≤±1 ℃；(2)满载热散布灭菌室的温度均匀性≤±1.5 ℃；(3)温度操控的规模,依据设备的精度自订。
4.3.2 热穿透实验
热穿透实验是验证灭菌器及灭菌程序对商品适用性的一项实验，目的是断定灭菌室装载中的“**冷点”，并承认该点在预订的灭菌程序中取得满足的无菌确保值。
4.3.2.1 热穿透实验的过程及请求
热穿透实验的过程及请求与满载热散布实验大体一样，shou要不一样在于温度探头放置方法上，热穿透实验请求温度探头应当刺进待灭菌商品中，插有温度探头的商品应放在以下方位: (1)热散布实验断定的**冷点方位；(2)蒸汽入口处或热散布实验断定的别的高温点方位；(3)灭菌器温度操控探头邻近；(4)温度记载探头处(假如灭菌器的温度自动操控和温度记载不是共用温度探头时)；(5)另需有记载腔室温度的探头,此探头不刺进商品中,方位在温度操控探头邻近。
热穿透实验**少需重复进行3次，实验前后都要将温度探头放入冰点槽和油浴里校对。4.3.2.2 热穿透实验可接受规范
(1)对于灭菌程序物品,装载中各点所得到的**小F0值应大于8 min；(2)**小F0值与均匀F0值的差值应不大于2.5%。
4.3.3 生物指示剂验证实验
对热穿透实验成果进行统计剖析可得出灭菌程序的运转参数，进而断定所用灭菌器对某一物品的灭菌程序。然后还要进行生物指示剂验证实验，行将一定量已知D 值的耐热孢子接入被灭菌的物品中，在预订的灭菌条件下灭菌，以验证设定的灭菌技术是不是真正能赋予物品所需的规范灭菌时刻F0值。
4.3.3.1 生物指示剂的耐热性
蒸汽压力灭菌程序验证，常用的生物指示剂有嗜热脂肪芽孢杆菌Bacillus stereathernophilus, 其常规微生物耐热参数D121 ℃值为1.5～3.0 min。因为同一生物指示剂在不一样介质或载体上的耐热性不一样，所以在实验前要测定生物指示剂在待灭菌物品中的耐热性，并依据其耐热性断定验证时所要接种的孢子数量，或是不是需求选用一种规范溶液来代替某物品作为生物指示剂的介质。
4.3.3.2 生物指示剂的装载
为了精确反映灭菌程序对物品的灭菌作用，生物指示剂一般被接种入被验证物品的包装容器中，如生物指示剂与被验证物品不相容，可用pH值及粘度与物品类似的介质，生物指示剂验证可与热穿透实验一起进行，装有生物指示剂的容器要紧挨着装有测温探头的容器，在灭菌设备的**冷点处有必要放置生物指示剂，冷点一般坐落蒸汽或冷凝水出入口邻近，为便于精确剖析验证实验成果，一切的生物指示剂与测温探头的放置应有相对应的编号。
4.3.3.3 生物指示剂验证合格规范
经生物指示剂验证后可证实在设定的灭菌程序或F0条件下，物品的无菌确保水平低于10-6。
