上海申安手提式灭菌锅在米曲霉固态发酵豆粕制备大豆肽的研究中的应用

米曲霉固态发酵豆粕制备大豆肽的研究  点击查看

 
1 材料与方法
1.1 材料与设备
1.1.1 材料
米曲霉A-9005:山东大学微生物实验室提供;
豆粕:山东万得福集团生产。
1.1.2 培养基
斜面培养基:米曲霉A-9005 查氏培养基[3];液体活化培养基:米曲霉A-9005 查氏培养基[3];
发酵培养基及其发酵:水质量分数65%,豆粕与麸皮按设计比例配制,pH 值5.4~7.0, 取28 g 分装于250 mL 三角瓶中,121 ℃,20 min 灭菌, 待用。
按10%冷却接种,于不同温度下进行发酵。
1.1.3 试剂
浓硫酸,双氧水,五水硫酸铜,硫酸钾,硒粉,硼酸,溴甲酚绿,甲基红,盐酸,氢氧化钠,以上试剂均为分析纯。
1.1.4 仪器设备
上海天平仪器厂FA2004 分析天平; 东联电子HZQ-Q 振荡器;北京医用LG10-2.4 高速离心机;苏州净化SW-CJ-2G 型双人净化工作台; 上海申安DSX-280AI 型不锈钢手提式灭菌锅;FOSS 分析公司全自动凯氏定氮仪; 上海精宏MJPS-150 型霉菌培养箱。
1.2 实验方法
1.2.1 工艺流程
原料(主要为豆粕)→固态发酵→三氯乙酸提
取→大豆肽提取液。
将接菌后的发酵培养基放入相对湿度90%霉菌培养箱,在不同温度下培养。
取一定量豆粕,按不同比例加入麸皮,调pH 值至5.4~7.0,发酵料坯含水率调节至65%。经灭菌、冷却,用米曲霉A-9005 接种,选择不同的发酵温度,
发酵过程和结束后测定发酵豆粕中酸溶蛋白含量。
1.2.2 提取及计算方法
称取5 g 样品(精确至0.0001 g), 加入5 mL10%三氯乙酸溶液,混合均匀,再加入10 mL 5%三氯乙酸溶液, 静置沉降5 min 后转到离心管中,在4000 r/min 下离心10 min, 取上清液并转到25 mL比色管中定容[4]。
酸溶蛋白测定:按GB / T 5009.5-2003《食品中蛋白质的测定方法》操作[5-6]。
大豆肽转化率= (酸溶蛋白含量/原豆粕蛋白含量)×100%。

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