SOP用于制备微生物培养基

1.0目标

制定微生物培养基,平板和斜面的制备程序。

2.0范围

此SOP适用于质量控制部门。

3.0责任

微生物学家

4.0问责制

品管部主管。

5.0程序

5.1要求

5.1.1天平
5.1.2脱水介质
5.1.3高压灭菌器
5.1.4层流气流
5.1.5玻璃器皿

5.2培养基的准备(使用脱水培养基)

5.2.1将脱水后的介质黑暗包装或按照制造商的指示密封包装。
5.2.2称取所需量的脱水培养基,然后将其加入装有纯净水的烧瓶中。
5.2.3用纯净水补足所需的体积。
5.2.4在灭菌前和灭菌后检查培养基的pH值,如果需要,请按照相应培养基容器中所述的HCl或NaOH溶液,按照相应培养基容器中所述调整pH值。
5.2.5根据需要将介质分配到烧瓶或试管中。
5.2.6用耐高温高压塑料盖/棉塞盖住烧瓶和试管,并用黄油纸/铝箔纸包裹。按照步骤中提到的步骤加载材料高压灭菌器操作的SOP。
5.2.7除非另有说明,否则可通过在15磅压力下于121°C高压灭菌15分钟来灭菌介质。
5.2.8在“媒体准备注册”中输入准备好的媒体的详细信息。
5.2.9还要在SOP(高压灭菌器的操作)的高压灭菌器灭菌记录中进行相关输入。
5.2.10将培养基在30至35°C的温度下预孵育48小时。
5.2.11如果是液体培养基,则目视检查是否有浑浊形式的增长;如果是固体琼脂,则目视检查是否存在浊度的增长。如果发现有任何增长,请丢弃介质。
5.2.12对每份灭菌培养基进行阳性对照试验。
5.2.13在低于25°C的温度下预温育15天后,将制备的无菌固体琼脂和液体培养基保存。

5.3倾盘的准备

5.3.1给培养基补水并按照培养基准备说明进行灭菌。
5.3.2将介质冷却至45°以下,并在无菌条件下将15 – 20 ml倒入无菌Petri板(直径9至10 cm)中。培养皿的底部应标有培养基名称的详细信息,批号。和准备日期。
5.3.2凝固并翻转培养皿。将板在30°C至35°C下孵育48小时。
5.3.4目视检查是否有污染。如有必要,丢弃。

5.4斜and的准备

5.4.1给培养基补水后,溶解琼脂培养基。
5.4.2在18 x 150毫米试管中分配约10毫升。用不吸水的棉花塞住试管,并用黄油纸覆盖。
5.4.3按照标签上的培养基准备说明进行灭菌。
5.4.4从高压灭菌器中取出试管并将其置于倾斜位置以使其倾斜,然后将试管放置在用于Butts的试管架中。
5.4.5确保倾斜的顶部不接触棉塞并使其凝固。
5.4.6在适当的温度下预孵育48小时。
5.4.7目视检查是否有污染。如有必要,丢弃。
5.4.8在试管上适当标记介质名称,批号和制备日期。
5.4.9在低于25°C的温度下进行预孵育后,请保存斜面。

5.5准备RODAC板

5.5.1给培养基补水并按照培养基制备说明进行灭菌。
5.5.2冷却培养基,并在无菌条件下倒入无菌RODAC板中。RODAC板的底部应标明介质名称,批号,制备日期等详细信息。

5.6培养基/灭菌负荷号的可追溯性

5.6.1每批准备和灭菌的培养基都分配有一个特定的批号,为8个字符,如下所示。
XX-YYZZM
XX:表示序列号 所准备媒体的
格式YY:表示月份
ZZ:表示年份
M:表示媒体的缩写。
5.6.2所有准备/灭菌的培养基批次应按月顺序编号。在分析数据表中记录
用于微生物检测的培养基名称和所有培养基的特定批号。
5.6.3阳性对照
枯草芽孢杆菌NCIM 2063(或等效物)的
微生物白色念珠菌NCIM 3471(或等效物)
对于差异培养基和选择性培养基,应在容器上用浓度小于100 cfu / ml的培养基分别接种微生物。

6.0缩写

6.1 HCl:盐酸
6.2 NaOH:氢氧化钠
6.3 QC:质量控制
6.4 IPA:异丙醇
6.5 NCIM:**家工业微生物集合
6.6部门:部门
6.7 SOP:标准操作程序