灭菌办法的规划

摘要：

  培育基是供微生物成长、繁衍、代谢的混合养料。因为微生物具有不一样的养分类型，对养分物质的请求也各不相同，加之试验和研讨的意图不一样，所以培育基的品种许多，运用的原料也各有差异，但从养分视点分析，培育基中通常富含微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、成长素以及水分等。另外，培育基还应具有适宜的pH值、必定的缓冲才干、必定的氧化复原电位及适宜的渗透压。灭菌常用的办法有化学试剂灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤除菌等。可根据不一样的需求，选用不一样的办法，如培育基灭菌通常选用湿热灭菌，空气则选用过滤除菌。

关键字：灭菌  办法  技能
   在医学中微生物的杀灭叫灭菌；灭菌的结果是无菌，也就是说指定样品经过一系列处理后不含任何微生物。例如手术器械的消毒进程等。微生物的灭菌假如用加热办法与温度有关外还和作用时刻有关。100度温度下加热30分摆布时分根本上大多数微生物会被杀灭，可是细菌的芽孢却破例，能耐高温。
   在医学实践中，常选用物理、化学及生物的办法，铲除环境中的微生物，以堵截传达路径，维护易感人群，然后操控或消除流行症。现将有关术语介绍如下：
   消毒 (disinfection) 杀灭物体上病原微生物的办法，称为消毒。用于消毒的化学药品称消毒剂。常用浓度下的消毒剂，只对细菌繁衍体有用，对其芽胞则需进步消毒剂浓度和延长作用时刻才干杀灭。
   灭菌 (sterilization) 杀灭物体上所有微生物，包含细菌芽胞的办法，称灭菌。
   无菌 (asepsis) 物体中无活的微生物存在，称为无菌。避免微生物进入机体或物体的办法，称为无菌操作或无菌技能。进行微生物学试验、外科手术、换药、打针时，均需严厉遵守无菌操作规定。
   防腐 (antisepsis) 避免或按捺微生物在物体中成长繁衍的办法，称防腐。用于防腐的化学药品称防腐剂。运用同一种化学药品低浓度时为防腐剂，高浓度则为消毒剂。
清洁整理 (sanitation) 将微生物污染了的无生命物体外表复原为安全水平的处理进程。例如医院内的病房、患者运用过的用具、布类的清洁处理等。
一、物理消毒灭菌法
   物理消毒灭菌法是医学实践中常用的办法，通常包含热力、紫外线、辐射、超声波和滤过除菌等。
(一)热力灭菌法
    热灭菌法 运用高温使微生物细胞内的悉数蛋白质变性，酶活性不见，致使细胞逝世。通常有干热、湿热和间歇加热灭菌等法。
   热力能损坏微生物的蛋白质和核酸，使蛋白质变性凝结，核酸解链崩裂，然后致使其逝世。
   1.干热灭菌法 直接运用火焰将微生物烧死（如烧接种环、载玻片和试管口等）。不能用火焰灭菌的物品则运用热空气灭菌,将物品放在烘箱中加热到160～170℃,继续90分钟，此法适用于玻璃、金属和木质的器皿。
   (1)燃烧与烧灼 燃烧仅用于抛弃的被病原微生物污染的物品、废物、人及动物尸身等。烧灼用于微生物试验室的接种环、金属器械、试管口、瓶口等的灭菌。
   (2)干烤 运用干烤箱灭菌，通常需加热**160℃～170℃经2h，可到达灭菌的意图。适用于玻璃器皿、瓷器、金属物品等的灭菌。
   2.湿热消毒灭菌法
   湿热灭菌 以沸水、蒸气和蒸气加压灭菌。巴氏灭菌法就是湿热灭菌，此法有两种办法，①低温长时刻处理：在61.7～62.8℃下处理30分钟；②高温短时刻处理：在71.6℃或略高温度下处理15分钟。在上述诸法中，以蒸气加压灭菌作用**佳，可用常压蒸气灭菌，也可在高压蒸气锅中（通常运用1千克/公分2）灭菌,其蒸气温度可达121℃,能将耐热的芽孢在30分钟内悉数杀死。但对某些易被高压损坏的物质，如某些糖或有机含氮化合物，宜在0.6千克/公分2压力下(110℃)灭菌15～30分钟。
   (1)巴氏消毒法 法G**巴斯德创用而得名。shou要以较低温度杀灭病原菌或特定微生物，而使物品中不耐热成分不被损坏。此法有两种：一种办法是加热61.1℃～62.8℃、30min；另一种办法是加热71.7℃、15～30s。现在大家多用后种办法对牛奶进行消毒。
   (2)煮沸法 煮沸100℃、5～10min，可杀死细菌繁衍体。芽胞则需求煮沸1～2h。常用于打针器、食具与饮水的消毒。
   (3)流转蒸气法 用阿诺(Arnold)蒸锅或普通蒸笼，加热100℃、15～30min，可杀灭细菌的繁衍体。若将消毒后的物品放入37℃孵箱培育，使芽胞发育成繁衍体，次日再蒸一次，如此接连三次以上，可到达灭菌作用，这种办法称为间歇灭菌法。常用于不耐高温的物品，如糖类、血清和鸡蛋培育基等的灭菌。#p#分页标题#e#
   (4)高压蒸气灭菌法 是一种敏捷而有用的灭菌办法。运用高压蒸气灭菌器，运用加热发生蒸气，跟着蒸气压力不断添加，温度随之添加，通常压力在103.4kPa(适当旧制的15磅/吋 2 或1.05kg/cm 2 )时，器内温度可达121.3℃，保持15～30min，可杀灭包含芽胞在内的所有微生物。此法常用于通常培育基、生理盐水、手术器械及敷料等耐湿和耐高温物品的灭菌。
(二)紫外线与电离辐射
   1.日光与紫外线 日光消毒是**简略、经济的办法，将患者的被褥、衣服、书报等在日光下曝晒数小时，可杀死外表的大多数微生物。日光中灭菌的成份shou要是紫外线。紫外线200～300nm时，具有灭菌作用，其间以265～266nm波长的紫外线灭菌力**强。紫外线的灭菌原理，shou要是细菌DNA吸收紫外线后，一条链上相邻的两个嘧啶经过共价键结合构成二聚体，然后搅扰了DNA的正常碱基配对，致使细菌逝世或变异。紫红外线能透过石英，但不能穿过通常玻璃或薄纸，因此，紫外线只适用于物体外表及空气的消毒。例如手术室、婴儿室、流行症房、无菌制剂室、微生物接种室的空气消毒。
   2.电离辐射 X射线、γ射线和阴极射线等电离辐射，有较高的能量与穿透力，因此可发生较强的致死效应。其机制在于发生游离基，损坏DNA。此法常用于大量一次性医用塑料制品的消毒；亦可用于中药成药和食品的消毒，而不损坏其化学成分和养分成分。
(三)超声波
   超声波是不被人耳感触的高于 20千周/s的声波。其灭菌机制shou要是它经过水时发生空化作用，而损坏了细菌细胞质的胶体状体，使其胞膜、胞质别离，胞壁及胞膜破碎致细菌繁衍体逝世。此法shou要用于粉碎细胞，以获取细胞组分或制备抗原等。
(四)微波
   是一种波长为 1mm到1m摆布的电磁波，称微波。它能穿透玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物质，但不能穿透金属外表。现在用于消毒的微波有2,450MHz与915MHz两种，常用于检验室用品、非金属器械、无菌病室的食品用具及其它用品的消毒。
(五)滤过除菌
   滤过除菌是用滤菌器阻留过滤液体和气体的细菌，以到达无菌的意图。滤菌器富含微细小孔，只允许液体或气体经过，而大于孔径的细菌等颗粒不能经过。常用滤菌器有蔡氏滤器、玻璃滤器、薄膜滤器及高效颗粒空气滤器四种。shou要用于不耐热的血清、抗毒素、生物药品以及空气等的除菌。
二、化学消毒法
   许多化学药物都有按捺或杀灭微生物作用，按作用不一样分为化学消毒剂和化学医治剂两类，用于消毒、防腐和医治疾病。
(一)常用消毒剂的品种和使用
   具有杀死微生物的化学药物称消毒剂。消毒剂对人体有毒性作用，只能外用，不能内服。shou要用于肌肤粘膜的伤口、器械、排泄物和周围环境的消毒。消毒剂在低浓度时也可作防腐用，但防腐剂的关键是应要对人体无毒性作用。消毒剂品种浓度与用处见表 13-1。
                       常用消毒剂的品种浓度与用处

(二)常用消毒剂的灭菌机制
   消毒剂灭菌原理通常有以下三方面：
   1.使菌体蛋白质变性或凝结 例如醇类、醛类、酸碱类以及高浓度的重金属盐和酚类。
   2.搅扰细菌的酶代谢体系 例如低浓度重金属盐、氧化剂与细菌胞浆中某些酶的-SH基结合，使酶活性丧失。
   3.损害细菌细胞膜 例如外表活性剂、脂溶剂、低浓度酚类等。
(三)影响消毒灭菌作用的要素
   消毒灭菌作用受微生物品种、消毒剂及环境等多种要素影响。
   1.消毒剂的性质、浓度与作用时刻 同一种消毒剂的浓度愈高，作用时刻愈长，灭菌作用愈好。但乙醇以70%摆布的消毒作用**佳。其原因是更高浓度的乙醇使菌体外表蛋白敏捷脱水凝结，影响乙醇渗入菌体内。
   2.细菌品种 同一消毒剂对不一样细菌的灭菌作用不一样，是因为不一样细菌抵消毒剂抵抗力不一样。细菌的幼龄菌抵消毒剂比较灵敏。
   3.有机物及别的要素 细菌常混合在血清、脓、痰、排泄物中，这些物质中的有机物可阻止消毒剂与细菌的触摸，并耗费药品，因此削弱消毒作用。
消毒剂在消毒灭菌进程中的温度、湿度、酸碱度、穿透力、外表张力等要素，都抵消毒灭菌的作用有必定影响。
三、生物要素对细菌的影响
   在自然界中，细菌与细菌之间，细菌与动植物之间存在着共生和拮抗的联系。咱们可以运用生物之间的拮抗作用，运用某些细菌的代谢产品、植物成分等按捺或杀灭病原性细菌，以防治流行症。
(一)抗生素(antibiotie)
   抗生素是由放线菌、真菌或细菌等微生物在代谢进程中发生，并能按捺或杀灭别的微生物的有机化合物。
抗生素的品种许多，有些已能人工组成，其抗菌机制shou要有以下几种：
   1.按捺细胞壁的组成，如青霉素、头孢霉素、杆菌肽等。
   2.添加细胞膜的通透性，按捺细胞膜的运输功用，如制霉菌素、多粘菌素等。
   3.按捺细菌蛋白质的组成，如氯霉素、四环素、庆大霉素、卡那霉素等。
   4.按捺细菌核酸的组成，如重生霉素、争气霉素等。
   抗生素在临床上广泛的使用，在医治流行症上起到了积极作用，但病原菌的耐药菌株日益增多。从患者标本中别离细菌作药物灵敏试验，以选用对致病菌灵敏的抗生素医治，是削减耐药菌株和进步抗生素作用的有用措施之一。
(二)噬菌体(bacteriophage)
   噬菌体是寄生于细菌的病毒，具有必定的形状构造和严厉的寄生性，需在活的易感细胞内增殖，并常将细菌裂解。
(三)中草药
   临床实践和试验研讨都证实有许多中草药有抑菌、灭菌作用，如黄连、黄柏、黄芩、连翘、金银花等，其不仅对多种细菌有抗菌作用，并且对某些抗生素耐药菌株也有抗菌作用。
   
   用理化办法杀死必定物质中的微生物的微生物学根本技能。灭菌的完全程度受灭菌时刻与灭菌剂强度的制约。微生物对灭菌剂的抵抗力取决于初始存在的集体密度、菌种或环境赋予菌种的抵抗力。灭菌是获得纯培育的必要条件，也是食品工业和医药*域中必需的技能。
 
参考资料：

1. 俞俊棠  生物工艺学--灭菌

2. 邱树毅  生物工艺学