湿热灭菌方法和注意事项

一、 煮沸消毒法
注射器和解剖器械等均可采用此法。先将注射器等用纱布包好,然后放进煮沸消毒器
内加水煮沸。对于细菌的营养体煮沸约15~30min,对于芽孢则需煮沸约1~2h。

二、高压蒸汽灭菌法
高压蒸汽灭菌用途广,效率高,是微生物学实验中**常用的灭菌方法。这种灭菌方法
是基于水的沸点随着蒸汽压力的升高而升高的原理设计的。当蒸汽压力达到1.05kg/cm2时,
水蒸气的温度升高到121℃,经15~30min,可全部杀死锅内物品上的各种微生物和它们的
孢子或芽孢。一般培养基、玻璃器皿以及传染性标本和工作服等都可应用此法灭菌。
操作方法和注意事项如下: 
(1)加水 :打开灭菌锅盖,向锅内加水到水位线。立式消毒锅**好用已煮开过的水,以便减少水垢在锅内的积存。注意水要加够,防止灭菌过程中干锅。
(2)装料、加盖 :灭菌材料放好后,关闭灭菌器盖,采用对角式均匀拧紧锅盖上的螺旋,使蒸汽锅密闭,勿使漏气。
(3) 排气 :打开排气口(也叫放气阀)。用电炉加热,待水煮沸后,水蒸气和空气一起从排气孔排出,当有大量蒸汽排出时,维持5min,使锅内冷空气完全排净。
(4)升压、保压和降压
当锅内冷空气排净时,即可关闭排气阀,压力开始上升。当压力上升**所需压力时,控制电压以维持恒温,并开始计算灭菌时间,待时间达到要求(一般培养基和器皿灭菌控制在121℃,20min)后,停止加热,待压力降**接近“0”时,打开放气阀。注意不能过早过急地排气,否则会由于瓶内压力下降的速度比锅内慢而造成瓶内液体冲出容器之外。

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